ADN recombinante natural

La recombinación genética es el proceso por el cual una hebra de material genético (generalmente ADN,pero también ARN) es rota y luego unida a una molécula de material genético diferente. La recombinación de eucariotas comúnmente se produce durante la meiosis.

Ejemplo de ADN recombiante para S. Aureus: No existen vacinas probadas y comercializadas, pero sí estudios con las mismas bases:

Vacuna quimérica IsdB 151-277 ClfA 33-213 (IC). 

El IC formulado con adyuvante AlPO 4 indujo una mayor protección en un modelo de sepsis por S. aureus en comparación con los componentes individuales solos y mostró una amplia protección inmunitaria.

Referencias:

Protective efficacy of the chimeric Staphylococcus aureus vaccine candidate IC in sepsis

Microarray en S. Aureus

Se han identificado muestras de plasma de 15 portadores de S. aureus y 15 antígenos inmunogénicos de S. aureus . Siete antígenos fueron reconocidos por los anticuerpos presentes en al menos el 60% de las muestras, que representan el núcleo del inmunoma de S. aureus de individuos sanos. Las concentraciones de inmunoglobulina G (IgG) en suero específicas de S. aureus fueron significativamente más bajas en las no portadoras que en las portadoras específicamente anti-IsaA, anti-SACOL0479 y anti-SACOL0480 IgG se encontraron en frecuencias y cantidades más bajas.

PCR para Estafilococo Aureus

Tema: Frecuencia de genes que codifican factores de virulencia en Staphylococcus aureus aislados de niños que concurrieron al Hospital General Pediátrico Niños de Acosta Ñú, durante el año 2010

Objetivo: Demostrar la presencia de genes codificadores propios de infecciones producidas por S. Aureus mediante el uso de PCR múltiplex.

Muestra: secreciones de piel, partes blandas y líquidos de punción.

Ácido nucléico: ADN genómico 

Gen: sea       521 pb
        seb        667 pb
        sec        284 pb
        sed        385 pb
        seh        358 pb
        hlA        704 pb
        hlB        496 pb
       eta          119 pb
       etb          200 pb

Extracción: simplificado basado en ebullición para la extracción rápida de ADN

PCR: PCR múltiplex
   35 ciclos
                     Temperatura:                                             Tiempo:
          D              95°                                                           30s
          H              60°                                                           30s
          E               72°                                                           60s

Visualización: EFO y revelado con cámara fotográfica bajo luz UV

Referencias: Frecuencia de genes que codifican factores de virulencia en Staphylococcus aureus

Ejemplo de PCR múltiplex

Prueba de tamizaje y confimatoria para Estafilococo Aureus

Se realizará un cribado de MRSA como prueba de tamizaje, para diagnosticar la presencia de Estafilococo Aureus en pacientes con factores de riesgo o que se crea que la infección se encuentra aún en forma asintomática, es decir, los portadores de tal infección. Para ello se utilizará muestras obtenidas con escobilla nasal o utilizada en mucosas.

En confirmatoria: Western Blot, prueba que requiere el uso de  Inmunoglobulina G para poder detectar la presencia de la proteína AgrA, la cual es propia del Estafilococo Aureus.

Westrn Blot para S. Aureus AgrA

Evaluación de cuatro métodos para la detección de Staphylococcus aureus